Twee jaar voorafgaand aan de openingsscène heeft de edelman Florestan bepaalde misdaden van de edelman Pizarro aan het licht gebracht of geprobeerd deze aan het licht te brengen. Uit wraak heeft Pizarro Florestan in het geheim gevangengezet in de gevangenis waarover Pizarro gouverneur is. De gevangenbewaarder van de gevangenis, Rocco, heeft een dochter, Marzelline, en een bediende (of assistent), Jaquino. De vrouw van Florestan, Leonore, kwam verkleed als jongen bij Rocco op zoek naar werk, en Rocco nam haar aan. Op bevel heeft Rocco Florestan steeds minder rantsoenen gegeven, totdat hij bijna uitgehongerd is. Plaats: Een Spaanse staatsgevangenis, een paar kilometer van Sevilla; Tijd: eind 18e eeuw.